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植物叶酸 elisa试剂盒检测工艺流程

   植物叶酸 elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物叶酸(FA)水平。用纯化的植物叶酸(FA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入叶酸(FA),再与HRP标记的叶酸(FA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的叶酸(FA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物叶酸(FA)浓度。

植物叶酸 elisa试剂盒


  植物叶酸 elisa试剂盒标本要求
  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
  2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
 
  植物叶酸 elisa试剂盒检测工艺流程:
  1、标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
  2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50?l,待测样品孔中先加样品稀释液40?l,然后再加待测样品10?l(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6、加酶:每孔加入酶标试剂50?l,空白孔除外。
  7、温育:操作同3。
  8、洗涤:操作同5。
  9、显色:每孔先加入显色剂A50?l,再加入显色剂B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  10、终止:每孔加终止液50?l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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