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酶免ELISA试剂盒的细节处理

一、细胞裂解液的细节处理:  

1. 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。  

2. 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。  

3. 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。  

4。 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。  

5. 4℃10000×g离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。     

二、酶免ELISA试剂盒组织匀浆液的细节处理:  

1. 将组织样本用PBS(0.01M, PH 7.4)冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。  

2. 将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分  

3。 将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。  

4。 吸取匀浆液到离心管,4℃5000×g离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

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