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ELISA实验结果不理想莫慌张

ELISA实验中难免会出现错误,实验结果不理想也时有发生,遇到这样的事情不要慌张,尽量找出解决问题的方法,今天就让上海劲马与您一起分享一下有哪些原因会使ELISA实验的结果不理想,和常见的解决方案。

 一,生物实验室的污染

     生物实验室产生的废液污染主要是化学性污染和生物性污染,另外还有放射性污染。我们经常认为实验室中的有机试剂并不直接参与发生反应,仅仅起溶剂作用,因此就直接把消耗的有机试剂以各种形式排放到周边的环境中,排放总量大致就相当于试剂的消耗量,然而日复一日,年复一年,这样累积下来的排放量就十分可观了。

二,ELISA试剂盒花板现象

    关于ELISA试剂盒结果“花板"的问题对检测数据造成了很大影响,往往会使检测者做出误判,是实验中必须要注意和避免的。

针对这种“花板"现象我们通过多次实验的分析和判断,总结了一些经验,分析如下:

1 标本、试剂、仪器

1。1 标本 出入境人员的血液标本。

1.2 试剂 HBsAg、HCV、HIV、梅毒试剂均为不同厂家的ELISA试剂盒。

1。3 仪器 LD4-2型脑心机BID RAD1575型洗板机BID RAD550酶标仪。

2 方法

   所有被检出入境人员的血液标本,按照各个厂家提供的ELISA试剂盒说明书进行HBsAg-HCV-HIV梅毒等检验项目操作。所有试剂均在有效期内使用。

3 结果

   所使用不同厂家的试剂有时会出现“花板"问题。

4 分析

    在所有标本进行检测的过程中,所用的仪器及加样过程都处于正常状态的情况下,步骤均按照各种试剂说明书的要求去做,排除实验所用仪器和操作步骤对实验结果的影响外,ELISA试剂盒内的空白、阴性和阳性对照以及室内质控值都很正常,只有检测的血液标本情况异常。根据国家和疾控中心报告阳性率的比例不应该是很高的情况下,HBsAg在用ELISA之前都经过了快速金标试剂的检测,阳性标本得到了一定的控制。因此,原因可能是在标本的处理,特别是放置时间、离心速度和离心时间方面的问题。所以,标本的处理就成为实验结果的主要可疑因素。为了避免“花板"现象的出现,降低检测的假阳性率,获取准确的实验结果,应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便省时的ELISA试剂。使用ELISA试剂盒对血液HBsAg-HCV-HIV及梅毒等实验检测的结果中,空白和阴性,阳性对照以及室内质控孔结果正常,根据卫生部临检中心提供的数据,HBsAg0.5ng1ng-HCV-HIV梅毒正常范围均为2NCU,但血液标本孔的OD值比较高(大多数OD值≥0.070)。标本的阳性率很高,每板除对照孔外,有时阳性高达10孔之多,而大多数真阳性标本都出现弱阳性结果。

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