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培养基神经胶质细胞培养方法

神经细胞(神经元〕不易培养基,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增值。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。

培养方法如下:

    1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后,仔细剥除脑膜、血管和纤维成分,置Hanks液中漂洗一、二次。

    2、置于30—50倍体积的Hanks液中,此时脑组织比较柔软,反复吹打即制成细胞悬液。

    3、把悬液注入离心管室温中直立5—10分钟后,细胞或细胞团快自然下沉,脂肪等杂物易漂浮,可吸除上层、反复二、三次,即可排除脂肪成分和其它碎块并获较多细胞成分。

    4、在沉降物中加入适量培养液,通过纱网成纱布过滤,计数并调整细胞密度。

    5、接入培养基瓶或皿中,置5%CO2温箱中培养。

    该细胞适应环境过程较长,接种后贴壁较慢。贴壁后短期内也可能不见细胞分裂现象,然而一旦生长后即能迅速进入旺盛的增殖状态。细胞传代可以0。25%胰酶消化处理。

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